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在明场显微镜下，染色标本通过削弱光振幅产生明暗对比得以成像。然而，未染色的活体生物样本透明度高，光穿透时振幅衰减微弱，无法形成有效对比度，使其难以被观测。虽然光透过这些标本时会因折射率差异产生相位差，但人眼无法直接识别相位信息。 相差显微镜通过独特的光学设计，将不可见的相位差转换为可分辨的振幅差（明暗变化），从而显著增强透明标本的对比度。
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